层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。所有的层析系统都由两个相组成：一是固定相，它或者是固体物质或者是固定于固体物质上的成分；另一是流动相，即可以流动的物质，如水和各种溶媒。当待分离的混合物随溶媒（流动相）通过固定相时，由于各组份的理化性质存在差异，与两相发生相互作用（吸附、溶解、结合等）的能力不同，在两相中的分配（含量对比）不同，而且随溶媒向前移动，各组份不断地在两相中进行再分配。与固定相相互作用力越弱的组份，随流动相移动时受到的阻滞作用小，向前移动的速度快。反之，与固定相相互作用越强的组份，向前移动速度越慢。分部收集流出液，可得到样品中所含的各单一组份，从而达到将各组份分离的目的。
表 按层析原理分类
名称 分离原理
吸附层析法 组份在吸附剂表面吸附固定相是固体吸附剂，各能力不同 分配层析法 各组份在流动相和静止液相（固相）中的分配系数不同 离子交换层析法 固定相是离子交换剂，各组份与离子交换剂亲和力不同
凝胶层析法 固定相是多孔凝胶，各组份的分子大小不同，因而在凝胶上受阻滞的程度不同 亲和层析法 是根据生物大分子和配体之间的特异性亲和力（如酶和抑制剂、抗体和抗原、激素和受体等），将某种配体连接在载体上作为固定相，而对能与配体特异性结合的生物大分子进行分离的一种层析技术。亲和层析是分离生物大分子**为有效的层析技术，具有很高分辨率。
表 按操作形式不同分类 名称 操作形式
柱层析法 固定相装于柱内，使样品沿着一个方向前移而达分离
薄层层析法 将适当粘度的固定相均匀涂铺在薄板上，点样后用流动相展开，使各组份分离 纸层析法 用滤纸作液体的载体，点样后用流动相展开，使各组份分离
薄膜层析法 将适当的高分子有机吸附剂制成薄膜，以类似纸层析方法进行物质的分离
依流动相分
根据流动相的形式分类，层析可以分为液相层析和气相层析。 1、气相层析是指流动相为气体的层析。 2、液相层析指流动相为液体的层析。
Rf值：主要是纸上层析法的用词。源自流速（rate of flow）。溶剂从原点渗透到距离a（一般在20—30厘米时测定）的时候，如果位于原点的物质从原点向前移动到b，那么b/a的值（0.0—1.0）就是这种物质的Rf值。
