适用于萜烯，桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine) 配制方法：茴香醛:HClO4:丙酮:水 (1:10:20:80)
（1）磷钼酸显色剂：磷钼酸 5%-10% 乙醇溶液，淡黄色，久置变为浅绿色，不影响使用。浸板或喷板，加热，浅黄色背景，还原性物质显蓝绿色斑点，如果斑点太浓，可能显深黄色。
（2）CAM显色剂:钼酸铵9.6g,硫酸铈0.4g,10%硫酸水溶液 200ml,混匀，极淡的黄色溶液，棕色瓶密闭保存，喷板，加热，白色背景，还原性物质显深蓝色斑点。
显色的方法各种各样，主要根据化合物的性质选择不同的显色方法。许多关于植物有效成分提取与分离的书上都有介绍，通用的有碘、硫酸乙醇、香草醛－硫酸等，当然还有许多专用的显色剂，如：溴甲酚绿使有机酸显黄色，三氯化铁使酚羟基显蓝色，碘化铋钾使生物碱显桔黄色..... 显色剂化合物
二甲氨基苯甲醛 氨基酸，多肽 磷钼酸苯酚类 若丹明 类酯类
薄层层析常用显色剂配制及显色方法
附录
附录1 薄层层析及纸层析常用显色剂配制及显色方法 通用试剂
(1) 重络酸钾-硫酸:检查一般有机物.
喷洒剂:5克重络酸钾溶于100毫升40%硫酸中. 薄层检查:喷洒后加热到150℃**班点出现 (2) 荧光素-溴:检查不饱和化合物喷洒剂:0.1克荧光素溶于100毫升乙醇中 溴试剂:5%的溴的四氯化碳溶液
喷洒后处理:喷洒荧光素溶液后,放置存有溴溶液的缸内,可于紫外线分析灯下检查荧光,荧光素与溴化和成曙红(Eosin)(无萤光),而不饱和化合物则成溴加成物,保留了原有荧光;若点样较多,则呈黄色斑点,底板呈红色. (3) 碘:检查一般有机物.
方法:a 层析谱放密闭缸内或瓷盘内，缸内预先放有碘结晶少许，大部分有机化合物呈棕色斑点。
B 层析谱放碘蒸气中5分钟（或喷5％碘的氯仿溶液）取出置空气中待过量的碘蒸气全部挥发后，喷1％淀粉的水溶液，斑点转成蓝色。 （4）硫酸：通用
喷洒剂：5％的浓硫酸乙醇溶液，或15％浓硫酸正丁醇溶液，或浓硫酸－醋酸（1：1） 喷洒后处理：空气中干燥15分钟，再热**110℃直**出现颜色或荧光。 （5）硝酸银－氢氧化铵（Tollen-Zaffaroni）试剂：检查还原性物质。 溶液I : 0.1%N硝酸银; 溶液II: 5N氢氧化铵 喷洒剂: I和II以1:5混合(临用前混合)
喷洒后处理: 105℃加热5~10分钟,**深黑色斑点出现.
(6)磷钼酸或磷钨酸,硅钨酸:检查还原性物质,类脂体,生物碱,甾体 喷洒剂: 5~10%磷钼酸或磷钨酸或硅钨酸乙醇溶液 喷洒后处理: 120℃加热**斑点出现.
沉淀试剂: 1克硅钨酸溶于20毫升水中,加10%盐酸**强碱性. 生物碱
(7)硫酸??=硫酸:检查生物碱及含碘化合物
喷洒剂: 0.1克硫酸?混悬于4毫升水中,加入1克三氯醋酸,加热**沸,逐滴加入浓硫酸**澄清. 喷洒后处理: 110℃加热数分钟**斑点出现.
(8)碘化铋钾(Dragendorff)试剂:检查生物碱及其他含氟化合物. 溶液I: 0.85克次硝酸铋溶于10毫升冰醋酸40毫升水中 溶剂II: 8克碘化钾溶于20毫升水中. #p#分页标题#e#
制备液I+II,等体积混合.可用于棕色瓶中保存较长时间,一般制备液可作沉淀试剂用. 喷洒液: 制备液1毫升与2毫升醋酸,10毫升水混合即得 (9).碘化汞钾(Mayer)试剂: 检查生物碱.
制备液: 13.55克氯化汞和49.8克碘化钾各溶于20毫升水中,等体积混合并用水稀释**1000毫升. 喷洒液: 制备液加1/10体积的17%盐酸.
喷洒后处理: 观察斑点,并于紫外线荧光分析灯下检出. (10) ?酸纳-浓硫酸(Mandelin)试剂:检查生物碱. 1%>酸纳的浓硫酸溶液.与多种生物碱呈不同颜色. (11)碘－碘化钾(Wagner)试剂:检查生物碱.
1克碘及10克碘化钾,溶于50毫升水中,加热,加2毫升醋酸,再用水稀释**100毫升. 可作纸层板显色剂,液可作沉淀试剂.
酚类,鞣质
(12)三氯化铁:检查酚类及??酸.
喷洒剂:1~5%三氯化铁的水溶液或乙醇溶液.并加盐酸少许.??酸呈红色斑点,酚类称蓝色或绿色斑点. (13)铁氰化钾-三氯化钾:检查酚类,芳香胺类及还原性物质.
喷洒剂: 1%铁氰化钾水溶液,2%三氯化铁水溶液.临用前等体积混合.
喷洒后处理: 喷洒后酚性物质呈蓝色斑点.再喷2N盐酸,能使颜色加深,纸谱可用烯盐酸洗去喷洒液. (14) 4-胺基安替比林-铁氰化钾(Emerson反应): 检查酚类. 喷洒剂: I . 2%4-氨基安替比林乙醇溶液; II. 8%铁氰化钾水溶液.
或用0.9%4-氨基安替比林和5.4%铁氰化钾水溶液
方法: 先喷洒I,再喷洒II,即显色,或再放入密闭缸中,缸内放25%氢氧化铵,即产生橙色**深红色. (15) 对氨基苯磺酸,重氮盐(Pauly试剂): 检查酚类,芳香胺类及能偶合的杂环化合物.
喷洒剂: 4.5克对氨基苯磺酸,加热溶于45毫升12N盐酸中,用水稀释**500毫升,取10毫升稀释液用冰冷却,加10毫升冷4.5%亚硝酸钠水溶液,0℃放15分钟(此试剂于0℃可保存3天),用前加等体积1%碳酸钠水溶液.
一般重氮化试剂,也可用联苯胺,对硝基苯胺等. (16) 对甲苯磺酸: 检查甾体,黄酮,鞣质. 喷洒剂: 20%对甲苯磺酸氯仿溶液.
喷洒后处理: 100℃加热数分钟,紫外线分析灯下检查荧光斑点.含氧杂环及蒽醌类* (17) 三氯化铝: 检查黄酮体.
喷洒1%三氯化铝乙醇液于紫外线荧光分析灯下检示,呈黄色荧光 (18)碱式醋酸铅: 检查黄酮体.
喷洒剂: 饱和碱式醋酸铅(或饱和醋酸铅)水溶液. 于紫外线荧光分析灯下检查荧光斑点. (19)醋酸镁: 检查蒽醌甙,甙元及黄酮体 喷洒剂: 0.5%醋酸镁甲醇溶液
方法: 90℃加热5分钟,呈红色**紫色斑点. (20)氢氧化钾: 检查香豆素,蒽醌甙及甙元 喷洒剂: 5~10%氢氧化钾的甲醇溶液. 于日光及紫外线荧光分析灯下检示斑点.
萜类,甾体
(21) 三氯化锑(Carr-Price试剂): 检查甾体,萜类,皂类.
喷洒剂: 25克三氯化锑溶于75克氯仿中(亦可以用氯仿或四氯化碳的饱和溶液). 喷洒后处理: 100℃加热5分钟,于紫外线荧光分析灯下检示荧光. (22) 五氯化锑: 检查甾体,萜类,皂甙.
喷洒剂: 五氯化锑-氯仿或四氯化碳(1:4),用前新鲜配制.
喷洒后处理: 120℃加热**斑点出现,并于紫外线荧光分析灯下检示. (23)香兰醛-硫酸: 检查**醇类,酚类,甾体,萜类,芳香油.
喷洒剂: 1克香兰素溶于100毫升浓硫酸,或0.5克香兰醛溶于100毫升硫酸-乙醇(4:1)中. 喷洒后处理: 室温或120℃加热观察显色斑点.
(24) 4-二甲氨基苯甲醛,醋酸,磷酸(E.P.试剂): 检查? Azulene 及?前体 Proazulene.
喷洒剂: 0.25克4-二甲氨基苯甲醛,溶于50毫升醋酸5克85％磷酸和20毫升水的混合液中(棕色瓶中保存数月) ?:烃室温即成蓝紫色斑点,>前体于80℃加热10分钟出现蓝紫色斑点.(25) 氯胺T－三氯醋酸: 检查强心甙. 喷洒剂: I. 3%氯仿T水溶液新鲜制备. II. 25%三氯醋酸乙醇溶液(能保存数天). 10毫升I加40毫升II,用前混合.
喷洒后处理: 110℃加热7分钟,紫外线荧光分析灯下检示呈蓝色或黄色荧光.
(26) 亚硝酸基铁氰化钠-氢氧化钠(Legal试剂): 检查不饱和内酯;甲基酮或活性次甲基,常用于强心甙 喷洒剂: 1克亚硝基铁氰化钠溶于100毫升2N氢氧化钠-乙醇(1:1)的水溶液. 显红色或紫色斑点.
(27) 3,5-二硝基苯甲酸(Legal试剂): 检查强心甙,α,β-不饱和内酯. 喷洒剂: 1克3,5-二硝基苯甲酸溶于50毫升甲醇,加入1N氢氧化钾50毫升. 强心甙呈紫红色斑点. 糖类
(28) 邻苯二甲基苯胺: 检查还原糖.
喷洒剂: 0.93克苯氨,1.66克邻苯二甲酸溶于100毫升水饱和的正丁醇中. 喷洒后处理: 105℃加热10分钟.
(29) 2,3,5-Triphenyl-tetrazolium chloride (T.T.C.)：检查还原糖及其他还原物质。 溶液I：4％（T.T.C.）甲醇溶液； 溶液II：1N氢氧化钠。 喷洒液：I，II，临用前等体积混合。
喷洒后处理：100℃加热5～10分钟，得红色斑点。 （30）Keller-Kiliani试剂：检查α－去氧糖，常用于强心甙。 试液：100毫升冰醋酸加三氯化铁试液0.5毫升混合均匀. #p#分页标题#e#
试样1毫克加试液2毫克溶解后,沿试官管壁滴入浓硫酸2毫升,接触面即显棕色,渐变浅绿,蓝色.**后冰醋酸层全部燃呈蓝色. (31) 1,3-二羟基萘-磷酸: 检查糖类.
喷洒液: 0.2%1,3-二羟基萘(Naphthoresorcinol)乙醇溶液100毫升,与10毫升85%磷酸混合.(32) 费林溶液(Fehling): 检查还原糖. 溶液I: 69.3克结晶硫酸铜溶于1000毫升水中. 上述二溶液如不清可滤过.临用前等体积混合. 氨基酸
(33) 茚三酮: 检查氨基酸及氨基糖.
喷洒剂: 0.3克茚三酮溶于100毫升正丁醇,加入3毫升醋酸;或0.2克茚三酮溶于100毫升乙醇(或丙酮中). 喷洒后处理: 110℃加热**斑点出现. (34) 吲哚醌: 检查氨基酸和一些肽.
喷洒剂: 0.2%吲哚醌(Isatin)丙酮溶液,含4%醋酸;或用100毫升1%吲哚醌丙酮溶液加10毫升醋酸. 喷洒后处理: 100~110℃加热10分钟.
(35) 1,2-萘醌-4-硫磺酸(Folin试剂): 检查氨基酸.
喷洒剂: 新鲜制备0.02克1,2-萘醌-4-磺酸钠,溶于100毫升5%碳酸钠中. 喷洒后处理: 室温放于,不同氨基酸出现不同颜色. 有机酸
(36) 酸碱指示剂: 检查有机酸.
喷洒剂: 0.05%溴酚蓝(或溴甲酚绿,或溴麝香草酚蓝)的乙醇溶液. (37) 氧化还原显色剂: 检查有机酸.
喷洒剂: I. 0.075%溴甲酚绿及0.025%溴酚蓝的无水乙醇液.
II. 0.5%高锰酸钾及1%碳酸钠.10H2O的蒸馏水液.临用前,取I和II按1:1混合后喷酒. 喷酒后处理: 稳定时间为5~10分钟.对不同的有机酸在纸谱上呈现不同颜色. (38) ??? (Acridine): 检查酸. 喷洒剂: 0.005%的??乙醇溶剂. 紫外线分析灯下呈黄色荧光. (39) 芳香胺-还原糖: 检查酸.
喷洒剂: 芳香胺(如苯氨5克)和还原糖(如木质糖5克)溶于50%含水乙醇中. 喷洒后处理: 125~130℃加热出现棕色斑点.
