1、 开机
打开仪器的主电源，打开电脑电源。待仪器自检完毕（CU950上面的3个指示灯完全点亮并不闪烁）。双击桌面上UNICORN图标，进入操作界面。 2、 准备工作溶液和样品
所有的工作溶液和样品必须经过0.45µm的滤膜过滤，样品也可高速离心后取上清备用。当缓冲液中含有有机溶剂（如乙腈、甲醇），需在使用前用低频超声脱气10min。 3、 清洗及管道准备
shou先将A1管道放入缓冲液或平衡液，binding buffer中，将B1管道放入高盐溶液中或elution buffer，在system control窗口点击工具栏内的manual，选择 pump→pump wash purifier，选中A1,B1管道为ON， execute。泵清洗将自动结束。 4、 安装层析柱
在manual里选择pump→flow rate，输入流速1ml/ml，insert；选择Alarm&mon→alarm pressure，设置high alarm（输入填料的耐受压力，可在填料说明书中查到），insert，execute。待
InjectionValve的1号位管道流出水后接入柱子的柱头，稍微拧紧后将柱下端的堵头卸掉接入管道连上紫外流动池。
5、 开始纯化：
1）选择检测波长，Alarm&mon→Wavelength→UV1,UV2,UV3(可以直打开一个波长)等待柱子平衡好了（观察电导COND，pH的数值和变化趋势）就准备上样了。此时将紫外调零，选择Alarm&mon→autozero，exectue。
2）用样品环上：将样品吸进注射器，推掉气泡，从injectionValve的3号位推入,推好后不要取下注射器。在manual里选择flowpath→injectionValve→inject，execute。
3）用泵上样：有A2入口）manual里选择flowpath→Ainlet→A2, insert, flowpath→injectmark, insert, execute待样品上完后，再将manual里选择flowpath→Ainlet→A1,平衡液中继续清洗柱子
2),3)选择一种方式 2),3)选择一种方式
4）洗脱：上样后用缓冲液尽量将穿透峰洗回基线。在manual里选择pump→gradient，按照自己的工艺选择targetB（100％）和length（10CV）。
5）设定收集：
固定体积收集：选择Frac→Man_fractionation,选择收集Rack型号、收集顺序以及tube类型，输入每管收集体积，exectue。结束固定体积收集选择Frac→fractionation_stop，exectue。
峰收集：选择Frac→Peak_fracParametersUV_Level,设定峰收集的参数，选择Frac→Peak_Man_fractionation设定峰收集每管收集的体积，exectue。结束峰收集选择Frac→Peak_frac_stop，exectue。 6、 清洗泵及卸下层析柱：
将A1和B1入口放入纯水中，启动pump wash purifier功能冲洗A泵和B泵及整个管路。然后再将A1和B1入口放入20％乙醇中，同样操作将乙醇冲满整个管路保存。系统给柱子一个慢流速，设置系统保护压力，然后先拆柱子的下端，正在滴水的时候将堵头拧上，再拆柱子的上端，**后拧上上端的堵头。整个过程防止气泡进入。 7、 关闭电源：
从软件控制系统的**个窗口unicorn manager点击退出，其他窗口不能单独关闭。然后关闭AKTA主机电源，关闭电脑电源。
